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常见问题&FAQ

Addgene是如何制备穿刺菌的？

收到Addgene质粒后，您应该怎么处理？

Addgene推荐的细菌保存方法？

下面这个视频中就这些问题做了详细的说明。如果感兴趣，赶快点击视频学习吧！别忘记了把好东西分享哦！

穿刺菌的制备

Addgene质粒以穿刺菌的形式运输。Addgene的技术人员会在装有甘油菌的小管上打上二维的条形码，每个穿刺菌对应一个单独条形码，以保证质粒被正确运输。

Addgene技术人员用无菌牙签取一些库存细菌，然后接种形成穿刺菌。穿刺接种的细菌在温箱中孵育过夜（每个质粒的生长温度信息可以在Addgene官网上查询），并在第二天上午检查其是否生长，技术员应该在制备的穿刺菌表面上能看到细菌。条形码在包装时要再次扫描以确保科学家收到正确的质粒样品。

质粒培养方法

您收到穿刺菌后，应该在4摄氏度冰箱中存放您的质粒样品。并在两周内，在含有相应抗生素（每个质粒的抗生素信息可以在Addgene官网上查询）的琼脂平板上划线培养出单菌落。然后从一个单菌落中挑取细菌，接种到液体培养基中，依据Addgene网站上质粒的生长条件进行过夜培养。

保存细菌时，需要将300 ul细菌的液体培养物和300 ul 50%的甘油按照1:1比例混合制成甘油菌，储存在-80摄氏度冰箱中。甘油菌通常是长期存储质粒的一个好方法。此外，您可以使用细菌培养物提取质粒以备以后使用或存放。

更多信息，可以访问Addgene网站上的相关内容。

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